Выделение - фермент
Cтраница 4
В корневых выделениях могут находиться ферменты с очень значительной активностью, помогающие растению усваивать элементы питания из органических соединений. Виохимики недавно изучали выделение ферментов у 23 видов травянистых и Древесных растений, представлявших 16 семейств. [46]
Показано, что этот тип разделения пригоден также для ферментов, токсинов и растительных вирусов. Для очистки и выделения ферментов широко используют гель-хроматографию [98] и ионообменную хроматографию на колонках с модифицированной целлюлозой. [47]
 |
Хроматография препарата ксантиноксидазы молока на DEAE-сефа-дексе градиентным элюированием. [48] |
В большинстве случаев схема выделения ферментов в гомогенном состоянии бывает гораздо сложнее. Последовательность операций приведена в табл. 36.4. Опуская некоторые детали, отметим, что все растворы содержали 1 мМ ЭДТА и не включали антиоксидантов. [49]
Это представление было подтверждено выделением ферментов, катализирующих отдельные стадии процесса. [50]
Даже у тех из нас, кому искусство выделения ферментов представлялось чем-то сверхестественным, возникло желание исследовать ферменты как химические вещества и появилась уверенность в том, что такой подход создаст в конце концов основу для понимания каталитических свойств ферментов. Последующие успехи в исследованиях стационарной кинетики двухсубстратных реакций и продолжающееся развитие методов предстационарной кинетики позволяют сейчас сравнительно просто анализировать формальные механизмы многих ферментативных реакций. [51]
Кинетический метод применительно к ферментативным реакциям имеет еще одно важное преимущество. Дело в том, что сложной проблемой энзимологии является выделение ферментов из биологического материала и их очистка вплоть до индивидуального состояния. Более того, не всегда могут быть точными критерии индивидуальности фермента. Все это в значительной мере затрудняет применение методов, обычно используемых в физической химии ( например, спектральных и др.), при исследовании механизмов ферментативных реакций. [52]
Другой случай, когда методы осаждения достаточно селективны, это пример белков, образующих малорастворимые соединения с другими полимерами. Здесь используют соосаждение с соответствующими полимерами в качестве приема для выделения фермента из смеси. Так, например, некоторые кислые белки образуют нерастворимые соединения с основными полипептидами про-таминами, выделяемыми из спермы рыб. [53]
Ясно, что один из непосредственных эффектов, вызываемых присутствием частиц кварца размером 0 1 - 1 0 мкм, состоит в том, что эти частицы поглощаются клетками макрофага. В клетках частицы вступают в реакции с мембранами лизосом, что приводит к выделению лизосомных ферментов. Последние не только убивают макрофаги, но и распространяются в окружающие ткани, что может вызвать фиброз. Действие кремнезема на мембрану лизосомы заключается в том, что такая частица, вероятно, разрывает мембрану, делая ее проницаемой. Зис-ман, Хирш и Аллисон [239] дали другое указание на то, что кремнезем вмешивается в окружающую систему по механизму иммунизации животных. [54]
В связи с этим знания о распространении ферментов в растительном мире расширят область их использования при лечении заболеваний и пополнят арсенал растений как источников сырья для выделения ферментов, которые могут найти применение в фармации и медицине. [55]
Страницы: 1 2 3 4