Cтраница 4
Этим же методом был определен и тиофос, хотя он и является сравнительно слабым ингибитором холинэстеразы. Предварительно тиофос был окислен концентрированной азотной кислотой до па-раоксона, обладающего сильным инактивирующим действием, которое могло быть измерено при его содержании в количестве нескольких сотых долей микрограмма. Метод предусматривает промывание экстракта растворами двууглекислого натрия и хлористого натрия, выпаривание эфира, инкубацию сухого остатка со стандартным раствором холинэстеразы в буферном растворе при 25 в течение 30 мин. Количество вещества находят из градуировочного графика, который построен с известными количествами данного вещества в тех же условиях. Все определение занимает около 2 час. [46]
Смесь нагревают и перемешивают при 40 в течение приблизительно 24 час. От начала до конца реакции смесь гетерогення. Мурапьиную кислоту отгоняют в вакууме, а остаток кипятят с обратным холодильником п течение 1 часа с 3 и. Затем основную часть этилового спирта выпаривают на паропой бане и к смеси прибавляют большое количество горячей поды, в результате чего гликоль пыделяется в виде маслянистого слоя. Когда гликоль становится твердым, подный слой сифони-руют, а полученное всщестпо снова расплвиляют под горячей водой и дают ему затвердеть. Соединенные промывные воды экстрагируют эфиром, чтобы изплечь небольшое количество растворенного гликоля, и полученный после выпаривания эфира остаток присоединяют к оснопной порции препарата. [47]
После того как прибавление будет закончено ( около 20 мин. Органический слой отделяют, а водный слой экстрагируют тремя порциями бензола по 250 мл. Органическую фазу и вытяжки соединяют, промывают водой и сушат над безводным сернокислым натрием. Остаток, полученный после испарения растворителя, обрабатывают раствором 447 5 г 85 % - ного гранулированного едкого кали в 3 5 л 95 % - ного этилового спирта и смесь нагревают при перемешивании в течение 4 час. Органический слой отделяют, а водную фазу ( содержащую некоторое количество выпавших в осадок сульфатов) экстрагируют двумя порциями эфира. Органическую фазу и вытяжки соединяют, промывают водой, затем насыщенным раствором хлористого натрия и в конце концов высушивают над безводным сернокислым натрием. Остаток после выпаривания эфира нагревают до 180 - 190, при этой температуре за 20 мин. Затем препарат перегоняют из видоизмененной колбы Клайзена. [48]
После того как прибавление будет закончено ( около 20 мин. Около 2 / 3 спирта отгоняют и к остатку прибавляют 2 л воды. Органический слой отделяют, а водный слой экстрагируют тремя порциями бензола по 250 мл. Органическую фазу и вытяжки соединяют, промывают водой и сушат над безводным сернокислым натрием. Остаток, полученный после испарения растворителя, обрабатывают раствором 447 5 г 85 % - ного гранулированного едкого кали в 3 5 л 95 % - ного этилового спирта и смесь нагревают при перемешивании в течение 4 час. Около 2 / з растворителя отгоняют, прибавляют сперва 3 л воды, а затем достаточное количество ( около 2 л) 6 к. Органический слой отделяют, а водную фазу ( содержащую некоторое количество выпавших в осадок сульфатов) экстрагируют двумя порциями эфира. Органическую фазу и вытяжки соединяют, промывают водой, затем насыщенным раствором хлористого натрия и в конце концов высушивают над безводным сернокислым натрием. Остаток после выпаривания эфира нагревают до 180 - 190, при этой температуре за 20 мин. Затем препарат перегоняют из видоизмененной колбы Клайзена. [49]