Cтраница 2
При высаливании белка нейтральными солями щелочных или щелоч-поземельных металлов, а также сернокислым аммонием необходимо приме-нять высокие концентрации этих солей. [16]
Как производится высаливание белков, чем оно определяется, как используется. [17]
На величину высаливания белков оказывают влияние не только природа и концентрация соли, но и рН среды и температура. Считают, что главную роль при этом играет валентность ионов. [18]
Каким образом производится высаливание белков, чем оно определяется, как используется. [19]
Малоселективными являются классические методы высаливания белков, когда растворимость белка понижается путем добавления соли, чаще всего сульфата аммония, в результате чего начинается выпадение белка из раствора. Так как растворимость различных белков зависит от концентрации соли несколько по-разному, то с помощью сульфата аммония производится частичное фракционирование белковых смесей. [20]
Наиболее часто используют метод высаливания белков концентрированными растворами солей. [21]
Если необходимо более точно определить границы высаливания белка, взять большее число различных концентраций сернокислого аммония. [22]
К обратимым реакциям осаждения следует отнести большинство реакций высаливания белков, а также осаждение их спиртом или ацетоном при непродолжительном действии этих реактивов на белок при низ; кой температуре. [23]
Удобен следующий прием медленного добавления сульфата аммония при изоэлектрическом высаливании белков: в забуференный раствор белка опускают целлофановый мешочек с твердым сульфатом аммония, электролит диффундирует через мембрану и вызывает осаждение белка. Осадок белка, содержащий неорганическую соль, диали-зуют ( дистиллированная вода): сульфат аммония удаляется и белок переходит в раствор. Для переосаждения используют описанный выше прием. [24]
На основании данных литературы и собственных исследований В. Ф. Крамаренко рекомендует для очистки применять высаливание белков и продуктов их распада безводным сульфатом аммония, центрифугирование и экстрагирование этиловым эфиром веществ, сопровождающих алкалоиды. Методика очистки описана на стр. Этим способом очистки устраняются процессы фильтрования, приводящего к потере алкалоидов за счет адсорбции фильтром и образования стойких эмульсий. [25]
Эти последовательности анионов и катионов вновь возвращают нас к ряду Гофмейстера, упомянутому в связи с высаливанием белков. Эти последовательности имеют несколько иной смысл по сравнению с только что упомянутой последовательностью ионов металлов четвертого периода, однако очевидно, что как ряд Гофмейстера, так и последовательность ионов четвертого периода выражают собой порядок гидратации ионов - четко проявляющееся явление координации. Ряд Гофмейстера для щелочных металлов коррелирует и с другими свойствами солевых растворов. [26]
Физико-химические и иммунологические исследования дали большое количество данных, свидетельствующих о том, что глобулярные белки имеют жесткую структуру, остающуюся неизменной при высаливании белков, их кристаллизации и растворении. Белки являются единственными соединениями этого рода. Каучук, крахмал и многие синтетические макромолекулы меняют расположение цепей при растворении и в связи с этим теряют ту специфическую структуру, которая присуща им в твердом состоянии. Развернутые цепи молекул этих соединений в растворе могут образовывать бесчисленное количество сочетаний с одинаковыми энергетическими уровнями, в связи с чем они не обнаруживают никакой специфичности. Специфичность белков связана с сохранением ими внутренней структуры, а последняя, в свою очередь, обусловлена наличием перекрестных связей между свернутыми пептидными цепями. В предыдущих разделах было указано на три типа этих связей: 1) дисульфидные мостики, образованные цистином; 2) солевые мостики, образованные карбоксильными группами аспарагиновой и глутаминовой кислот и аминогруппами лизина или гуанидиновыми группами аргинина; 3) водородные связи между пептидными группировками и полярными группами аминокислот. [27]
Нарушение устойчивости растворов полимеров при понижении температуры, добавлении нерастворяющей жидкости или высоких концентраций солей приводит к различным случаям расслоения на две фазы, выпадения полимеров, высаливания белков и др. Зависимость растворимости полимеров от молекулярного веса создает возможность их фракционирования путем дробного осаждения или растворения. Переход от полного смешения к ограниченной растворимости определяет также различные случаи коацервации. [28]
Растворимость белков также сильно зависит от рН, с минимумом в изоточке ( рис. 74); при смещении от изоточки возрастают заряд и гидратация белковых молекул и повышается их растворимость, поэтому при высаливании белков всегда поддерживают рН близким к изоточке. [29]
Растворимость белков также сильно зависит от рН, с минимумом в изоточке ( рис. 75); при смещении от изоточки возрастают заряд и гидратация белковых молекул и повышается их растворимость, поэтому при высаливании белков всегда поддерживают рН близким к изоточке. [30]