Гель - агароза
Cтраница 1
Гель агарозы, используемый как носитель для определения молекулярной массы и / или разделения биополимеров методами хроматографии или электрофореза. [1]
Гель агарозы, который также используется в качестве носителя для гель-хроматографии, поступил в продажу совсем недавно. [2]
Гели агарозы [ 5АС ( аголель) - 10, 8, 6, 4 и 2 ] с пределами исключения молекулярной массы 25 - 104 - 15 - 107 поставляются также фирмами Seravac Labs. [3]
Гель агарозы промывают 2 М фосфатным буфером и отфильтровывают при отсасывании. [4]
Гель агарозы подсушивают, отсасывая на воронке со стеклянным фильтром в течение 5 мин, и взвешивают. [5]
 |
Спектры солюбилизированной агарозы. [6] |
Гели агарозы могут быть растворены в горячей воде, немодифицированная агароза растворяется при 60 С. При последующем охлаждении высококонцентрированных водных растворов агарозы получаются непрозрачные растворы, в то время как более разбавленные растворы становятся вязкими, но остаются прозрачными. [7]
Гели агарозы с присоединенными ферментами освобождают от буфера промыванием на стеклянном фильтре ( № 3) дистиллированной водой, водно-ацетоновой смесью, содержание ацетона ь которой постепенно увеличивается. Проводят кислотный гидролиз ( 6 М соляная кислота) навески модифицированного геля при 110 С в течение 24 ч в закрытом эвакуированном сосуде. Аминокислотный анализ гидролизата проводят на аминокислотном анализаторе и содержание белка рассчитывают по содержанию аспарагиновой и глутаминовой кислот, аланина и лейцина. При высоком содержании углеводов гидролизах темнеет, однако это не мешает анализу. [8]
Гели агарозы выпускаются в виде водных суспензий с добавкой 0 02 % азида натрия в качестве консервирующего агента. [9]
К уплотненному гелю агарозы, сформировавшемуся при оседании агарозы в буфере, в количестве, эквивалентном 3 г сухого веса носителя, добавляют 3 мл раствора ЛДГ в концентрации 1 мг / мл. ЛДГ предварительно обессоливают на колонке с сефадек-сом G-50, уравновешенной 0 1 М Na-фосфатным буфером, рН 7 4, содержащим 5 мМ ЭДТА. Инкубацию проводят в течение 10 мин при комнатной температуре и постоянном осторожном перемешивании. [10]
 |
Свойства гелей агарозы ( по данным фирм-изготовителей. [11] |
Область применения геля агарозы несколько неопределенна, поскольку отсутствуют необходимые высокомолекулярные соединения с известным молекулярным весом, которые могли бы служить стандартами. Преимущество этого геля, несомненно, заключается в его способности разделять вирусы, фаги, фрагменты клеток и бактерии. [12]
Сшивки в геле агарозы обусловлены не ковалентными, а водородными связями между цепями полисахарида. Этим объясняется бблыная чувствительность агарозы к воздействию таких реагентов, которые способны разрушать водородные связи. Агароза устойчива в интервале рН 4 - 9 и в интервале температур 1 - 40 С. Относительно концентрированные растворы солей, например 1М раствор хлорида натрия, или мочевины ( до 2М) не влияют на хроматографические свойства агарозы. [13]
Сефароза - это гель агарозы со сферическими частицами; в продажу поступает в виде суспензии в воде ( в набухшем состоянии), содержащей 0 02 % азида натрия в качестве бактериостати-ческого агента. [14]
Носители на основе гелей агарозы, содержащие очень мало заряженных групп. Интервал фракционирования определяется концентрацией агарозы в гранулах. Может быть использован в растворах, содержащих высокие концентрации солей, мочевины, гуанидингидрохлорида, хотя в условиях, способствующих сильной диссоциации, предпочтительнее использовать сефарозу CL. Разрушается под действием окислителей. Плавится при нагревании; не следует использовать при температуре 40 С. [15]
Страницы: 1 2 3 4