Cтраница 1
![]() |
Схематическое изображение механизма разделения частиц в жидкостной ситовой хроматографии. [1] |
Гель-фильтрация применяется главным образом для отделения макромолекул от низкомолекулярных солей, буферного обмена в растворах макромолекул, фракционирования макромолекул, особенно биополимеров в водных растворах, изучения ассоциации молекул ( измерение свободных и связанных небольших молекул в растворах макромолекул), определения констант равновесия в растворах макромолекул и полиэлектролитах. [2]
Гель-фильтрация, для которой используют сшитые декстраны или полиакриламидные гели, основана на разделении углеводов по размеру их молекул; ее применяют для предварительного разделения полисахаридов до начала определения их строения. Ионообменную хроматографию применяют для разделения углеводов с ионизируемыми группами. Однако в боратном буфере можно разделить и нейтральные сахара; в этих условиях они превращаются в боратные комплексы [39], которые затем фракционируют на ионообменной смоле в бо-ратной форме. Эти виды колоночной хроматографии часто используют совместно для определения степени чистоты и микрогетерогенности углеводсодержащего образца. [3]
Гель-фильтрация все шире используется для фракционирования белков сыворотки. Наиболее подходящим в данном случае является сефадекс G-200. С колонки этого геля белки сыворотки элюи-руются тремя пиками. Первый пик соответствует в основном липо-протеидам и макроглобулинам, вторым пиком выходит IgG, в третьем пике содержатся главным образом альбумин и трансферрин. [4]
Гель-фильтрация применяется главным образом для отделения макромолекул от низкомолекулярных солей, буферного обмена в растворах макромолекул, фракционирования макромолекул, особенно биополимеров в водных растворах, изучения ассоциации молекул ( измерение свободных и связанных небольших молекул в растворах макромолекул), определения констант равновесия в растворах макромолекул и полиэлектролитах. [5]
Гель-фильтрация является наиболее мягким способом фракционирования целлюлаз. Метод наиболее эффективен для отделения целлобиаз, имеющих значительно более высокую молекулярную массу, чем эндоглюканазы и целлобиогидролазы, или низкомолекулярных эндоглюканаз с молекулярной массой менее 20000 Да. Недостатком метода является многократное увеличение объема наносимых образцов в ходе элюции, что требует последующего концентрирования, длительность процесса. [6]
Гель-фильтрация относится к важнейшим методам, применяемым для очистки ферментов и других белков. Чаще всего она используется на завершающих этапах технологических схем выделения и очистки. [7]
Гель-фильтрация является наиболее мягким способом фракционирования целлюлаз. Метод наиболее эффективен для отделения целлобиаз, имеющих значительно более высокую молекулярную массу, чем эндоглюканазы и целлобиогидролазы, или низкомолекулярных эндоглюканаз с молекулярной массой менее 20000 Да. Недостатком метода является многократное увеличение объема наносимых образцов в ходе элюции, что требует последующего концентрирования, длительность процесса. [8]
Гель-фильтрация позволяет разделять молекулы по их размеру. Разделение этим методом осуществляется просто, занимает мало времени и может быть использовано как для аналитических, так и для препаративных целей. Метод особенно полезен для разделения веществ биологического происхождения. [9]
Гель-фильтрация широко используется в медицинских лабораториях и для разделения компонентов биологических объектов. [10]
Гель-фильтрация обладает рядом преимуществ по сравнению с диализом как метод очистки растворов от солей. Метод позволяет легко отделять от макромолекул не только соли, но и другие молекулы с низкой молекулярной массой. Например, при помощи гель-фильтрации можно отделять нуклеиновые кислоты от нуклеотидов и фенолов, полисахариды от сахаров, белки от аминокислот и других низкомо лекулярных соединений. [11]
Гель-фильтрация часто позволяет при условии тщательного проведения эксперимента количественно охарактеризовать состав [31] и устойчивость [32] таких комплексов. [12]
Гель-фильтрация позволяет использовать это явление для определения содержания альбумина в сыворотке. [13]
Гель-фильтрация подтвердила, что образующееся соединение имеет большую молекулярную массу, чем метас, окзил и продукты взаимодействия их с хроматами. [14]
Гель-фильтрация на пластинках не требует какого-либо дорогостоящего оборудования. Правда, в этом случае не пригодна и обычная аппаратура для тонкослойной хроматографии. По краям вдоль пластинки закреплены два пластиковых стержня ( толщина 0 5 см), на которых фиксируется стеклянная покровная пластинка. [15]