Гель-фильтрация

Cтраница 2

Гель-фильтрация применяется в производстве пока мало, главным образом вследствие высокой стоимости сефадекса и иных подобных материалов. [16]

Гель-фильтрация на сефадексах позволяет примерно оценить молекулярную массу полимеров и довольно широко применяется в последнее время. [17]

Гель-фильтрация осуществляется с помощью молекулярных сит, например сефадексов. Это нитевидные молекулы полисахарида дек-страна, сшитые через определенные промежутки поперечными связями и свернутые в гранулы. [18]

Гель-фильтрация ( эксклюзивная хроматография) биополимеров при высоком давлении делает еще свои первые шаги, поэтому естественно, что методические подходы здесь претерпевают быстрое изменение и появляющиеся в периодической печати рекомендации достаточно противоречивы. Мы постараемся отметить эти противоречия, понимая, что право их окончательного разрешения принадлежит только практике эксперимента. [19]

Гель-фильтрацию используют для разделения белков и определения их молекулярной массы. [20]

Гель-фильтрацию успешно применяют для разделения смеси веществ, различающихся по молекулярным массам. Это могут быть различные метаболиты микроорганизмов, в том числе - полидисперсные белки и полисахариды. Причем небольшие по размеру молекулы разделяемых веществ способны проникать в гель-насадку, и поэтому они движутся в хроматографической колонне более медленно, тогда как большие молекулы не проникают в частицы геля и движутся быстрее - они выходят из колонны в первую очередь. [21]

Хроматография орнитин-карбамоилтрансферазы на геле фосфата 1 кальция. [22]

Гель-фильтрацию проводят на сефадексе G-200 в указанном рабочем растворе, что дает двукратное увеличение удельной активности. Ультрацентрифугирование проводят в градиенте плотности сахарозы ( 30 мл 25 % - ного раствора NaCl 0 1 M орнитин; 30 - 10 % - ная сахароза), внося в каждую пробирку 1 мл фрак-циих полученной после дробного осаждения ацетоном. После центрифугирования ( Beckman, угловой ротор типа 60 Ti; 5 C; 60000 об / мин; 6 - 12 ч) собирают фракции ( объемом 7 мл) и объединяют фракции, содержащие активный фермент. Эта стадия дает двукратное увеличение активности. [23]

Гель-фильтрацию широко используют для определения молекулярных масс биополимеров, особенно белков. Чем меньше белок, тем больше объем элюции его с колонки ( F); это, как мы видели - основной закон гель-фильтрации. Графики селективности ясно указывают на наличие линейной связи между логарифмом молекулярной массы белка ( log М) и величиной Kav ( или Kd) в определенном интервале значений М для каждого типа геля. Казалось бы, задача этим решается. [24]

Схематическое изображение механизма разделения частиц в жидкостной ситовой хроматографии. [25]

Гель-фильтрацией называется хроматогра-фический метод разделения веществ по размерам их молекул, в котором используют гидрофильные макрогели, набухающие в водных системах. [26]

После гель-фильтрации на пластинках 10 - 20 см гель сефадекса удаляют механическим путем, оставляя только полоску шириной 3 - 5 см, содержащую разделяемые белки. Затем пластинку заливают расплавленным агаром ( охлажденным до 50 С), который при застывании образует гель толщиной 1 мм. При аккуратном выполнении этой операции агар покрывает полоску сефадекса, не нарушая слоя. Таким путем удается получить хорошие зоны преципитации, однако следует заметить, что эта методика требует большого экспериментального навыка. Полоски помещают на агаровый гель, где осуществляют Иммунодиффузию. [27]

При гель-фильтрации разделение происходит по размерам молекул. Чаще всего для этой цели используются декстрановые гели ( сефадексы) с различной степенью сшивки. От числа поперечных связей зависит размер пор в геле. Приготовление хроматографических пластинок с сефадексом описано в разд. [28]

Для гель-фильтрации используются так называемые молекулярные сита - инертные гидратир ованные полисахаридные материалы, представляющие собой пористые гранулы. [29]

При гель-фильтрации раствор, содержащий разделяемые вещества, пропускают через колонку, заполненную зернами набухшего полимера. Вещества, молекулы которых имеют большой размер и не могут проникать внутрь этих зерен, выходят из колонки вместе с растворителем. Меньшие по размеру молекулы других веществ диффундируют в набухшие зерна и задерживаются ими. Затем эти вещества вымывают из колонки чистым растворителем. Выбор полимера для гель-фильтрации определяется размерами молекул и химическими свойствами разделяемых веществ, а также природой растворителя. [30]

Страницы: 1 2 3 4