Cтраница 3
Полный гидролиз нуклеиновых кислот приводит к образованию эквивалентных количеств фосфорной кислоты, пентозы и пу-риновых или пиримидиновых оснований. При гидролизе нуклеиновых кислот ферментами желудочного или поджелудочного сока образуются мононуклеотиды. [31]
Эти соединения встречаются в природе не только в качестве продуктов или субстратов обмена нуклеиновых кислот; по крайней мере некоторые из них входят также в состав нуклеотидных коферментов ( см. гл. Среди продуктов гидролиза нуклеиновых кислот обнаруживаются циклические 2, З - дифосфаты всех рибонуклеотидов ( см, стр. [32]
Дезоксирибонуклеиновая кислота относится к группе полимеров, называемых нуклеиновыми кислотами. В результате изучения продуктов гидролиза нуклеиновых кислот было установлено, что мономерами нуклеиновых кислот являются нуклеотиды. При гидролизе последних образуется смесь гетероциклических аминов, пентоз и фосфорной кислоты. При гидролизе нуклеиновой кислоты в основном получается 4 гетероциклических амина: аденин, гуанин, цитидин и тимин ( фиг. Каждая из нуклеиновых кислот содержит либо ри-бозу, либо дезоксирибозу. Схема гидролиза нуклеиновых кислот приведена на фиг. [33]
При введении 7 М мочевины в состав элюирующего раствора вторичное взаимодействие подавляется. Таким образом, продукты нуклеазного гидролиза нуклеиновых кислот могут быть разделены главным образом по их зарядам. [34]
Перечисленные выше основания, соединяясь с ри-бозой ( или дезоксирибозой), образуют нуклеози-ды. Эти соединения были выделены при гидролизе нуклеиновых кислот. [35]
Гипоксантин, 6-оксипурин, часто встречается в природе как в растениях, так и в животных. Он получается, подобно ксантину, гидролизом нуклеиновых кислот. Наиболее удобный способ получения состоит в частичном гидролизе трихлорпурина и дальнейшем восстановлении, как уже отмечалось выше. [36]
Глюкозиды представляют весьма большой - интерес. К группе N-глюкозидов относятся нуклеозиды ( продукты гидролиза нуклеиновых кислот, стр. [37]
Хотя на данном этапе методы химического гидролиза не позволяют сделать выбора между 3 - 5 - и 2 - 5 -межнуклеотидными связями, доказательства, по-видимому, исключительного присутствия 3 - 5 -структуры были получены на основании исследований ферментативного гидролиза рибонуклеиновых кислот и простых нуклеотидных производных. Из различных источников был выделен ряд нуклеаз, которые катализируют гидролиз нуклеиновых кислот на более мелкие фрагменты. Панкреатическая рибонуклеаза [93] - один из группы ферментов, обнаруживающих высокую специфичность к рибонуклеиновым кислотам - была тщательно изучена и дано объяснение механизма ее действия. [38]
Нуклеиновые кислоты, подобно белкам, представляют собой соединения с высокой молекулярной массой. В то время как при гидролизе белков образуется смесь аминокислот, при гидролизе нуклеиновых кислот получается смесь, содержащая фосфорную кислоту, сахар и некоторые органические основания. [39]
Аденозин-5 - моно - аденозин-5 - ди - и аденозин-5 - трифосфорные кислоты. Эмбден, 1927 г.) аденозинфосфорная кислота, изомерная и отличающаяся от так называемой дрожжевой адениловой кислоты ( аденозин - З - фосфорной кислоты), полученной гидролизом нуклеиновых кислот. Эта мышечная адениловая кислота ( выделенная впоследствии из многих других животных и растительных материалов и универсально распространенная) может быть превращена ферментативным дефосфорилированием в аденозин. Инозиновая кислота известна уже давно; она была выделена из мясного экстракта Либихом. [40]
Белки, входящие в состав нуклеопротеидов, бывают чаще всего гистонами и протаминами. Эти щелочные белки образуют с нуклеиновыми кислотами солеобразные соединения. При гидролизе нуклеиновых кислот образуются пуриновые и пиримиди-новые основания а также сахара: рибоза - из РНК или дезо-ксирибоза из ДНК и фосфорная кислота. [41]
В течение многих лет результаты трудоемких и весьма грубых анализов нуклеиновой кислоты, проведенных первыми исследователями, указывали, как полагали, на эквимолекулярные отношения двух пуриновых ( аденин и гуанин) и двух пиримидиновых ( урацил и цитозин) оснований. Позже применение хроматографии на бумаге [222] и, в меньшей степени, ионообменной техники дало быстрые и относительно точные методы количественного определения компонентов рибонуклеиновых кислот. При гидролизе нуклеиновой кислоты щелочью образуются мононуклеотиды, которые могут быть затем разделены либо как таковые, либо в виде нуклео-зидов, после дефосфорилирования. Кислотный гидролиз, напротив, дает пуриновые основания и пиримидиновые мононуклеотиды. Спектрофотометр ическое определение подвергнутых разделению компонентов после элюирования их с бумаги ( с применением электрофореза [223] или хроматографии) или с ионообменной смолы позволяет получать молярные соотношения оснований. [42]
В нуклеиновых кислотах D-рибоза содержится в виде фуранозы, глюкозидно связанной с некоторыми производными пиримидина и пурина и с фосфорной кислотой. Она получается гидролизом нуклеиновых кислот разбавленными кислотами. [43]
Цитидиловая и уридиловая кислоты. Оба эти соединения по своему строению соответствуют мононуклеотидам, но вместо пуринового ядра имеют цитозиновое и, соответственно, урациловое. Они были получены при гидролизе нуклеиновой кислоты дрожжей разбавленной щелочью при комнатной температуре и, следовательно, являются структурными единицами этой нуклеиновой кислоты. [44]
Принцип метода основан на выделении рибонуклеиновых ( РНК) и дезоксирибону-клеицовых ( ДНК) кислот и на дальнейшем их анализе прямыми и косвенными методами. К прямым методам относятся такие, которые включают гидролиз нуклеиновых кислот с последующим выделением из гидролизатов пуринов и пиримидинов и определение их хроматографи-ческим методом. Хроматография позволяет производить точный микроанализ нуклеиновых кислот. Исследование пуринов и пиримидинов проводят в ультрафиолетовом свете, наблюдая флуоресценцию пятен на хроматограммах или в экстрактах, полученных из соответствующих участков хроматограмм. Кроме хроматографического метода, применяют также способ электрофореза на бумаге. [45]