Гидролиз - белок
Cтраница 1
 |
Кристаллы пепси-ногена.| Кристаллы пепсина. [1] |
Гидролиз белков происходит под влиянием ферментов или при кипячении белков с растворами кислот или щелочей. [2]
Гидролиз белка производится при помощи кислот ( соляной, серной, йодистоводородной), щелочей ( гидроокись натрия или бария) или протеолитических ферментов. Серная кислота была использована Браконно в 1820 г. [46] для гидролиза желатины. В дальнейшем стали пользоваться соляной кислотой [15], применение которой в настоящее время общепринято. После гидролиза избыток соляной кислоты удаляют многократным выпариванием. [3]
Гидролиз белков кислотой обычно сопровождается разрушением ( в результате окисления) большей части триптофана, окислением цистеина в цистин и некоторым распадом серина и треонина. Щелочной гидролиз имеет то преимущество перед кислотным, что триптофан в этих условиях более стабилен. Однако при щелочном гидролизе имеет место интенсивный распад серина, треонина, цистина, цистеина и аргинина. Кроме того, при щелочном гидролизе наблюдается рацемизация природных аминокислот. Гидролиз белка как кислотой, так и щелочью сопровождается дезамидированием глутамина и аспарагина. [4]
Гидролиз белков дает смесь этих и других аминокислот с аминогруппой при С-2. Обычно их называют - аминокислотами. [5]
Гидролиз белков проводят нагреванием с разбавленными кислотами или щелочами при обычном или повышенном давлении. В результате получаются смеси а-аминокислот. Некоторые аминокислоты при этом претерпевают изменения. [6]
Гидролиз белков, по сути дела, есть не что иное, как гидролиз амидных связей ( фиг. [7]
Гидролиз белков, по существу, сводится к гидролизу полипептидных связей. К этому же сводится и переваривание белков. Во время пищеварения белковые молекулы гидролизуются до аминокислот, которые, будучи хорошо растворимы в водной среде, проникают в кровь и поступают во все ткани и клетки организма. [8]
Гидролиз белков и пептидов. Этот тип состоит в разрыве пептидной ( кислотоамидной) связи с образованием свободных аминной и карбоксильной групп. Его осуществляет громадное число микроорганизмов или выделенных из них ферментов. Процесс очень сложен и тесно связан со специфичностью применяемых биокатализаторов; получаемые продукты разнохарактерны и определяются главным образом первичной структурой расщепляемых белков или пептидов. [9]
Гидролиз белков 3Af / г-толуолсульфокислотой или 4М метан-сульфокислотой [7,8], содержащей 0 2 % триптамина, в вакууме при 110 С, в течение 3 суток с хорошим выходом приводит к аминокислотам, включая триптофан, однако углеводы могут мешать. Триптофан можно определять также после щелочного гидролиза, но при этом разрушаются полностью аргинин, цист ( е) ин, серии и треонин. Общее содержание амидов, обусловленное наличием аспарагина и глутамина, можно определить после гидролиза 10 М НС1 при 37 С в течение 10 суток и последующего анализа на аммиак с помощью микродиффузионной техники. Раздельное определение аспарагина и глутамина можно провести с помощью предварительной этерификации ( метанол-уксусный ангидрид) свободных карбоксильных групп, последующего восстановления ( борогидрид лития) образовавшихся сложноэфирных групп и определения аспарагиновой и глутаминовой кислоты после кислотного гидролиза соответственно в виде у-гидрокси-ос-аминомасляной кислоты и б-гидрдкси-а-аминовалериановой кислоты. Содержание аспарагина и глутамина получают путем вычитания этих величин из содержания аспарагиновой и глутаминовой кислот после полного гидролиза немодифицированного белка. [10]
Гидролиз белков можно провести ферментативно или используя кислоты и щелочи. Надо отметить, что в щелочной среде инактивируют-ся некоторые витамины. При кислотном гидролизе белков разрушаются незаменимая аминокислота - триптофан и некоторые витамины группы В. [11]
Гидролиз белков не идет сразу до аминокислот. Выделены промежуточные продукты гидролиза, более сложные, чем аминокислоты, но проще, чем белки, известные под названием альбу-моз и пептонов. [12]
Гидролиз белков катализируется пепсином желудка и трипсином поджелудочной железы, эрепсином и другими протеолити-ческими ферментами. Продуктами этого гидролиза являются разные пептоны, пептиды и аминокислоты. [13]
Гидролиз белков кислотами в более мягких условиях, чем это необходимо для полного гидролиза до аминокислот, широко используется в белковой химии как ценный метод фрагментации пептидных цепей. Основная задача при применении этого метода состоит в выборе условий, позволяющих получить возможно менее сложную смесь пептидов. К сожалению, математические подходы к решению вопроса слишком сложны; как отметил Сэнджер, в ходе кислотного гидролиза, за исключением момента приближения его к концу, нет такой фазы, когда состав гидролизата не был бы сложным. [14]
Гидролиз белка обычно производят кислотами, щелочами или соответствующими ферментами. Сухой белок смешивают примерно с 10-кратным объемом 20 5-процентной кислоты и помещают на 30 - 60 мин. После этого смесь кипятят с обратным холодильником в течение 12 - 48 час. [15]
Страницы: 1 2 3 4