Cтраница 2
Наиболее известным металлоферментом, катализирующим гидролиз пептидной связи, является карбоксипептидаза. [16]
Симха [1145] приводит данные о кинетике гидролиза пептидной связи. [17]
Было установлено различие в константах скорости гидролиза внутренних и внешних пептидных связей в случае, если они построены из одних и тех же аминокислот. Это можно объяснить, предположив, что омыление внешних пептидных связей зависит главным образом от индуктивных эффектов, а внутренних - от стерических. [18]
Экспериментально определенное авторами увеличение объема А при гидролизе пептидной связи ( при атмосферном давлении) составило около 14 см3 на моль гидро-лизованных пептидных связей. Таким образом, давление 6000 атм может заметно смещать равновесие гидролиза в сторону исходных белков. [19]
В кишечном соке открыты два фермента-аланин-аминопептидаза, катализирующая преимущественно гидролиз пептидной связи, в образовании которой участвует N-концевой аланин, и лейцин-аминопептидаза, не обладающая строгой субстратной специфичностью и гидролизующая пептидные связи, образованные любой N-концевой аминокислотой. Оба фермента осуществляют ступенчатое отщепление аминокислот от N-конца полипептидной цепи. [20]
Содержащие металл ферменты, такие как лейцинаминопептидаза, катализируют гидролиз N-концевой пептидной связи за счет образования хелатного соединения между ферментом, субстратом и ионом металла. Колмен ( 1963) сообщил о селективном N-концевом гидролизе простых пептидов ионами ыс-о. [21]
Таким образом, появляется возможность компенсировать изменение термодинамического потенциала гидролиза пептидной связи путем изменения термодинамического потенциала при сорбции диполярного иона. Наиболее вероятным представляется процесс синтеза из полипептидов среднего молекулярного веса, а также процессы диспропорционирования. [22]
Есть множество таких реагентов и условий, которые не вызывают гидролиза пептидных связей, но которые тем не менее разрушают биологические свойства и активность белков. [23]
ХИМОЗИН ( реннин, сычужный фермент), фермент класса гидролаз, катализирующий гидролиз пептидных связей, образованных преим. [24]
Обработка белков 6 М НС1 при 110 С в вакууме приводит к гидролизу пептидных связей, но одновременно с этим происходит разложение триптофана, гидролиз аспарагина и глутамина соответственно до аспарагиновой и глутаминовой кислот, а также частичное разложение серина, треонина, цист ( е) ина. Пептидные связи между аминокислотами с объемистыми боковыми группами, такими как Не и Val, более устойчивы к гидролизу. Хорошо известно, что гидролизуя образцы белков в течение 1, 2 и 3 дней, необходимо экстраполировать количество таких аминокислот, как Ser и Thr к нулевому времени, а Не и Val - к бесконечному. В случае цист ( е) ина целесообразно перед гидролизом либо окислить его в цистеиновую кислоту, либо превратить в S-карбоксиметилци-стеин или 4-пиридилэтилцистеин ( см. разд. Обычно, в особенности если белок содержит углеводы, образуются продукты осмоления. После гидролиза соляную кислоту лучше удалить, так как она мешает при последующем разделении аминокислот. [25]
Химотрипсиноген превращается в химотрипсин [28, 29], а проинсулин - в инсулин [30, 31] специфическим гидролизом пептидных связей. Эти процессы активации заключаются в превращении единичных полипептидных цепей химотрипсиногена и проинсулина в три полипептидные цепи химотрип-сина и две - инсулина соответственно. В обоих случаях некоторые внутри-цепочечные дисульфидные связи становятся межцепочечными в процессе активации, приводя к появлению ковалентно связанных полипептидных цепей. [26]
При 25 и рН 7 изменение свободной энергии ( AG) при гидролизе пептидной связи в таких дипептидах, как глицилглицин или аланилглицин, составляет примерно - 4 ккал / моль. [27]
Более того, в обычных условиях равновесие сильно смещено влево, в сторону гидролиза пептидной связи. Поэтому для синтеза пептидов применяются не сами аминокислоты, а их более реакционноспособные производные. Такой прием часто называют активированием аминокислоты. [28]
Важнейшим результатом этих исследований является установление, что каждый протеолитический фермент является специфичным для гидролиза пептидной связи определенной аминокислоты. Так, пепсин гидролизует исключительно пептидную связь аминного конца остатка фенилаланина или тирозина. Для этого необходимо также наличие свободной карбоксильной группы в боковой цепи соседней аминокислоты или SH-грушш остатка цистеина. Действие пепсина ингибируется соседней КН2 - группой. [29]
В настоящее время они применяются преимущественно для селективного определения амидного азота в белках, хотя каталитический гидролиз пептидных связей также не лишен интереса вследствие своей возможной специфичности. [30]