Cтраница 3
Крахмал имеет молекулярную массу 105 - 107 Да. При частичном кислотном гидролизе крахмала образуются полисахариды меньшей степени полимеризации-декстрины, при полном гидролизе - глюкоза. [31]
По химическим и физическим свойствам этот радиоактивный полисахарид оказался подобным ксилану. При частичном кислотном гидролизе полимера были получены олигосахариды ( СП 2 - 7), по свойствам идентичные ксилодекстринам. Эти олигосахариды были идентифицированы путем хроматографического сравнения их с растительными 3 - ( 1 - - 4) - ксилодекстринами. [32]
Первоначально [59, 60] была предложена частичная формула, отвечающая ацилтрипептиду RCO-Phe - aWo - Thr-Ala, в котором детальное строение ненасыщенной и окисленной цепи радикала ( R) не могло быть определено из-за разложения в ходе жесткого кислотного гидролиза, необходимого для расщепления RCO-Phe - амидной связи. Однако амид фенилаланина относительно легко получается частичным кислотным гидролизом всех микозидов группы С. Метиловый эфир ( RCO-Phe-OMe) дает хороший масс-спектр [54], подтверждающий структуру аиильного радикала. [33]
Сходное строение с орозомукоидом имеет а-глобулин, выделенный из плазмы крови теленка, - фетуин. Некоторые детали строения фетуина выяснены в результате ферментативного и частичного кислотного гидролиза. [34]
Методы частичного гидролиза используются широко, но почти все они лишены специфичности и поэтому пригодны только для получения мелких фрагментов, например на конечных этапах расщепления больших пептидов. Самым старым из методов неспецифического, частичного гидролиза является частичный кислотный гидролиз. [35]
Цистеиновая кислота не найдена в составе биологически активных полипептидов. Типичными примерами могут являться соединения, выделенные Консденом и Гордоном [515] из продуктов частичного кислотного гидролиза шерсти. В ряде случаев была доказана идентичность выделенных соединений с синтетическими образцами. [36]
Второй гликопротеин куриного белка - овомукоид имеет молекулярный вес примерно 28 000 и содержит около 20 % углеводов, в числе которых находится манноза, галактоза, глюкозамин и небольшие количества N-ацетилнейраминовой кислоты. Строение углеводных цепей - овомукоида еще не установлено, однако в результате протеолиза59 и частичного кислотного гидролиза выделено несколько гликопептидов. [37]
Правильность структуры кислоты А подтверждается тем, что она не содержит свободных аминогрупп, устойчива к щелочам и при ее частичном кислотном гидролизе отщепляется лейцин, а не валин. Кислота В не содержит свободных аминогрупп, устойчива к щелочи, и при ее частичном кислотном гидролизе образуется N-метиллейцин. [38]
Было установлено, что АКТГ имеют 39 аминокислотных остатков в полипептидной цепи. Для установления последовательности аминокислот двумя группами исследователей были использованы различные протеолитические ферменты в сочетании с частичным кислотным гидролизом или без него. В первом случае после переваривания трипсином и химотрипсином были получены пептидные фрагменты, разделение которых достигалось с помощью электрофореза, противоточного распределения, ионообменной и бумажной хроматографии. [39]
Декстрин представляет собой смесь продуктов частичного расщепления крахмала, декстрана и некоторых других углеводов. Декстрин получают термической обработкой крахмала в течение 5 - 6 ч при 180 - 190 С или частичным кислотным гидролизом крахмала соляной кислотой в течение 3 - 3 5 ч при 125 - 155 С. Для изготовления клеев применяют в основном кислотный декстрин. [40]
В последнее время получено много данных о тонкой структуре углеводной части веществ групп крови и о природе детерминантных группировок. Основными путями исследования явились: изучение инги-бирования агглютинации эритроцитов различными моно - и олигосаха-ридами, ферментативный гидролиз и, наконец, выделение и идентификация фрагментов с антигенной активностью, полученных частичным кислотным гидролизом веществ групп крови. [41]
Среди описанных методов химического расщепления наибольшее применение при исследоаании первичной структуры белков находит деградация бромцианом по остаткам метионина. Относительно широко используется расщепление по остаткам триптофана и по связи Asn-Cly. Значительно реже применяют частичный кислотный гидролиз по саязи Asp-Pro и расщепление по остаткам цистеина и тирозина. При расщеплении белков по остаткам метионина, триптофана и цистеина обычно образуются крупные пептидные фрагменты, содержащие в среднем 40 - 80 аминокислотных остаткоа, что связано с низким содержанием этих аминокислот а белках. [42]
Позднее работа Санжера по расшифровке полной структуры инсулина [141] была удостоена Нобелевской премии. Первоначальное окисление инсулина надмуравьиной кислотой [139] приводило к расщеплению трех цистиновых мостиков, давая шесть остатков цистеиновой кислоты - два в основной фенил-аланильной цепи, содержащей 30 аминокислот, и четыре в гли-цильной цепи, содержащей 21 аминокислоту. Пептидные фрагменты, полученные дицитрофенилированием [138] и частичным кислотным гидролизом фенилаланильной цепи, удалось разделить с помощью методов ионообменной хроматографии, ионофо-реза, адсорбции на древесном угле, бумажной хроматографии. Для получения больших пептидных фрагментов, а также для локализации амидных остатков было проведено ферментативное расщепление трипсином, пепсином и химотриц-сином. [43]
Установление строения бензилиденовых производных Сахаров представляет собой сложную проблему. Известно много представителей таких производных ( в особенности для ациклических производных моносахаридов), строение которых не установлено до сих пор. Химические методы доказательства структуры, основанные главным образом на частичном кислотном гидролизе с последующим метилированием и идентификацией частично метилированных Сахаров, позволяют, в лучшем случае, определить только места присоединения бензилиденового остатка. [44]
Структура КСО-Рпе-а / / о - Тпг - А1а - аланинол обнаружена в большинстве соединений группы микозида С. Проверка фракций микозида С, по предварительным данным содержащих пентапеп-тид - Phe ( a / / o - Thr-Ala) 2 - [60] или даже гептапептид - Phe ( a / / o - Thr-Ala) 3 - [53], показала ( как упоминалось выше), что существует только пентапептид, присоединенный к концевому амино-сиирту молекулы. Mace-спектрометрия этих сложных соединений не дала результатов, но после частичного кислотного гидролиза и ацетилирования были получены хорошие масс-спектры 2 - О-ацетил - 3 4-ди - О-метил-рамнозида и N-ацетил-аланинола. [45]