Денатурация

Cтраница 4

Денатурация большинства белков приводит к увеличению гидрофобности их поверхности за счет экспонирования ранее недоступных для растворителя остатков гидрофобных аминокислот. Нуклеози-ды, а тем более нуклеотиды и нуклеиновые кислоты более гидрофильны за счет остатков Сахаров и ( особенно) фосфорной кислоты. [46]

Денатурацию чаще всего осуществляют кратковременным нагреванием раствора ДНК в 0 12 М Na-фосфатном буфере до 97, ренатурацию - охлаждением до так называемой критической температуры, которая на 20 - 25 ниже температуры плавления данной ДНК. Эту операцию, по аналогии с технологией обработки стали, называют отжигом. В отсутствие денатурирующих добавок температура отжига обычно близка к 60; в случае высокого содержания в ДНК ГЦ-пар она может быть заметно выше. Перед денатурацией ДНК необходимо тем или иным способом раздробить на фрагменты длиной 400 - 500 нуклеотггдных пар. Без такого дробления не только сильно замедлится процесс ренатурации, но и благодаря наличию разбросанных по длине ДНК одинаковых ( повторяющихся) последовательностей нуклеотидов может образоваться пространственная сетка молекул ДНК. [47]

Денатурацией обычно считают всякую модификацию структуры белковой молекулы, которая приводит к заметным изменениям ее свойств. Исключение составляют модификации, обусловленные изменением состава белка или разрушением его кова-лентных связей, например при гидролизе самих пептидных цепей. [48]

Денатурацией называют процесс разрушения двухцепочечной вторичной структуры ДНК. В прошлом было не вполне ясно, обязательно ли при этом происходит разделение цепей. Можно легко представить себе разрушение двухцепочечной структуры ДНК и без разделения цепей. Денатурирующие агенты часто вызывают и более глубокие изменения, например нагревание приводит к уменьшению числа пурииовых оснований в полинуклеотидных цепочках. [49]

Практически денатурация при этих условиях была бы спонтанным процессом, и натуральный протеин был бы неизвестен. Поэтому процесс активации, повидимому, состоит в разрыве тех мостиков, уничтожение которых не сопровождается значительным увеличением энтропии. Те мостики, разрыв которых действительно сильно увеличивает энтропию, разрываются спонтанно. [50]

При денатурации изменяется удельное оптическое вращение белков. [51]

Однако денатурация может быть и необратимой, если в белке произойдут химические изменения, приводящие к необратимому изменению его свойств. В качестве примера укажем, что протеины яичного белка необратимо денатурируются при достаточно продолжительной варке яйца. [52]

Модель молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты. [53]

При денатурации происходит перегруппировка части звеньев цепи с нарушением первоначальной специфической конфигурации и рельефа боковых групп, вследствие чего изменяются или утрачиваются различные свойства белковой молекулы. Спиральная конфигурация белковых молекул со множеством внутримолекулярных химических, водородных, солевых и других связей придает всей молекуле значительную жесткость, что способствует устойчивости структуры активных центров. Благодаря высокой однородности молекул глобулярного белка по форме, размерам и конфигурации они образуют трехмерные кристаллы ( размером до долей миллиметра) с хорошо развитыми гранями. Влажные кристаллы, с включением 30 - 60 % воды, дают на рентгенограммах множество точечных интерференции, по которым изучаются размеры, молекулярный вес и внутренняя укладка полипептидных цепей. [54]

Для денатурации добавляют пиридин, метанол и бензин. [55]

При денатурации изменяются физические свойства белка, снижается растворимость, способность к гидратации, теряется его биологическая активность. Меняется форма белковой макромолекулы, происходит агрегирование. В то же время увеличивается активность некоторых химических групп, облегчается воздействие на белки протеолитических ферментов, а следовательно, он легче гидро-лизуется. [56]

Страницы: 1 2 3 4