Cтраница 2
Растворитель: смесь диизопропиловый эфир-муравьиная кислота-вода ( 90: : 7: 3); длина пути разделения 12 см. Выделенные кислоты: / - щавелевая, 2 - малоновая, 3 - янтарная. [16]
Для лучшего понимания проблемы следует помнить, что эти величины являются производными по отношению к длине пути разделения. Функцию потока следует рассматривать с этих же позиций. Понятия, введенные в данной главе, в особенности концепцию, связанную со временем, можно использовать во всех остальных хроматографи-ческих методах. Многоплановость такого исследования представляется полезной. [17]
Другие условия эксперимента: температура 21 2 С, расстояние между линией погружения пластины и стартовой линии 0.1 см, длина пути разделения 4 см, скорость элюирования обычная. Для получения данных с высокой степенью точности необходимо проводить по три измерения на каждой из трех пластин. Зоны следует наносить вдали от краев пластины. [18]
В ВЭТСХ можно получить высоту тарелки в пределах 10 - 15 мкм, что обеспечивает несколько тысяч ступеней разделения в зависимости от длины пути разделения. [19]
На рис. 3.10 представлена диаграмма, аналогичная предыдущей, с той лишь разницей, что предварительное разделение проводили на участках, соответствующих 20 % и 10 % длины пути разделения. [20]
На рис. 6.2 и 6.3 представлена графическая зависимость между высотой тарелки и длиной пути разделения от линии старта до фронта. Длину пути разделения Z / ( мм) откладывают по оси абсцисс, высоту тарелок ( мкм) - по оси ординат. На рис. 6.2 четыре горизонтальных ряда графиков расположены в зависимости от размера частиц силикагеля. Кривые, соответствующие более крупным размерам частиц, расположены сверху, кривые для мелкодисперсных фракций - снизу. В каждом из опытов использовали тщательно отобранные и фракционированные силикагели. Три кривые на отдельной диаграмме соответствуют ( сверху вниз) трем различным объемам проб, наносимым на слой сорбента, а именно 2, 0 75 и 0 1 мкл, содержащим 2000, 750 и 100 нг индивидуального вещества. Изменение размеров частиц вызывает уменьшение высоты тарелки от ряда 4 к ряду 3 и от ряда 3 к ряду 2, тогда как при переходе от ряда 2 к ряду 1 высота тарелки значительно увеличивается. В вертикальных столбцах, соответствующих различной толщине слоя, в столбце 1 ( минимальная толщина слоя) высота тарелки выше, чем в столбцах II и III, между которыми существует незначительная разница. [21]
Следует отметить, что изменения толщины слоя сорбента необходимо учитывать только в случае, когда длина пути разделения превышает несколько сантиметров. Уменьшение длины пути разделения приводит к улучшению результатов детектирования. Чтобы получить оптимальное разделение, изменяют длину пути разделения в соответствии с размерами частиц сорбента: меньшим размерам частиц соответствует меньшая длина пути разделения. [22]
По сравнению с обычными ТСХ-пластинками уменьшение размеров ВЭТСХ-пластинок с закрепленным слоем не отражается на хроматографических характеристиках. Уменьшение длины пути разделения приводит к сокращению времени разделения на ВЭТСХ-пластинках. Уменьшение диаметра стартового пятна позволяет снизить предел обнаружения при детектировании. Разрешение на этих пластинках в 1 6 раза выше, а соответствующее число теоретических тарелок увеличивается в три раза. [23]
Хаворс и Хиткот [55, 56] разработали новую систему разделения и идентификации 76 аминокислот и других азотсодержащих метаболитов в биологических жидкостях. Разделения проводили методом двумерного элюирования; длина пути разделения на слоях целлюлозы MN 300 составляла 13 см. Целлюлозу предварительно очищали, как это описано в гл. Позднее [ 56а ] состав второй смеси был несколько изменен: 2-метилбутанол - 2-бутаиои-пропанон - метанол-вода-аммиак ( уд. После первого разделения пластинки сушили 15 мин током холодного воздуха, а затем в конвекционной печи 15 мин при 60 С, чтобы полностью удалить следы соляной кислоты. [24]
Чистое время удерживания ts и мертвое время tm ( время удерживания несорбирующегося вещества) используют для того, чтобы подчеркнуть принципиальную теоретическую связь ВЭТСХ с элюептными методами. Необходимо помнить, что ts и tm соответствуют длине пути разделения, точнее, относительным расстояниям. В книге все данные, характеризующие хроматографический процесс, являются в основном относительными величинами. [25]
ВЭТСХ, обусловливает небольшое время разделения, особенно при движении элюепта по горизонтальной пластинке, а не против силы тяжести. Для пластинки размером 10 X 10 см при длине вертикального пути разделения 4 5 см время разделения уменьшается в 3 - 4 раза. Это очень ценно при массовых анализах и особенно в исследовательских разработках, когда приходится ожидать результатов подбора оптимальной системы растворителей, перед тем как приступать к дальнейшему планированию экспериментов. [26]
Открытую N-камеру можно не рассматривать но отношению к другим видам камер в связи с разницей в эффектах испарения, благодаря которым величины К для этого типа камер значительно занижены, а время разделения существенно завышено. В сэндвич-камере величины К должны быть постоянными независимо от длины пути разделения, что было подтверждено в случае бензола и пропанола-1. Сильное возрастание величины К в случае применения ацетона для значений Zf, не превышающих 100 мм, предполагает предварительное насыщение сорбента из газовой фазы благодаря высокому давлению паров ацетона. Это происходит даже в сэндвич-камере с расстоянием между поверхностью сорбента и крышкой 1 мм. Уменьшение К для гексана при Zf 70 мм и для четыреххлористого углерода при Zf 60 мм можно объяснить только эффектами испарения. Степень предварительного заполнения пор сорбента из газовой фазы в зависимости от Zf можно рассчитать по величине К, которая различна для N-камеры и 1-миллиметровой сэндвич-камеры. На основании полученных данных пришли к выводу, что при выборе растворителя или системы растворителей в качестве элюента ( табл. 6.9) необходимо учитывать такие характеристики, как удельная масса, температура кипения, давление паров и теплота испарения. Такой подход тем более важен в случае использования смесей растворителей. В соответствии с нашими собственными исследованиями поверхностное натяжение растворителей не играет сколько-нибудь заметной роли в хроматогра-фическом разделении. В присутствии сорбента величина Y, очевидно, изменяется в значительной степени. Уменьшение вязкости при повышении температуры оказывает положительное влияние на величину К. [27]
При использовании обычных высококачественных пластинок с закрепленным слоем силикагеля 60 на длине пути разделения 100 мм оптимальная высота тарелки достигает 0 040 мм. На ВЭТСХ-пластинках при анализе такого же количества вещества на длине пути разделения 40 мм оптимальная высота тарелки составляет 0 012 мм. [28]
В ряду 3 оптимальная высота тарелки примерно соответствует длине пути разделения 100 мм, тогда как в ряду 2 путь разделения значительно меньше и равен приблизительно 50 мм. Следует отметить, что подъем кривых происходит постепенно с ростом длины пути разделения. В ряду 4 ( тонкодисперсный силикагель) оптимальная высота тарелки соответствует еще меньшей длине пути разделения. В последнем случае при определенных условиях высота тарелки резко возрастает с увеличением длины пути разделения. Таким образом, можно прийти к заключению, что каждой фракции частиц сорбента соответствуют оптимальная длина пути разделения и, следовательно, оптимальная высота тарелки. Графики 3 / II и 2 / II построены для сорбентов с размером частиц, используемым для обычных и ВЭТСХ-пластинок с закрепленным слоем. [29]
В скобках указаны значения, рассчитанные по уравнению Кайзера. В таблице представлены основные параметры, определяющие число разделений в линейной ТСХ: качество пластинки ( Ьг - Ь0) выражается размыванием зоны в зависимости от длины пути разделения и ширины стартового пика. Уменьшение Ь0 ведет к увеличению числа разделений. В редких случаях удается получить ширину стартового пятна ( сумма ширины стартового пятна и приращения ширины за счет диффузии, зависящей от времени) менее 1 - 2 % длины пути разделения. Значительно легче получить числа разделений, заключенные в рамку ( табл. 2.1), особенно в тех случаях, когда не применялись специальные методики и материалы, такие, как, например, ТСХ-пластинки с тончайшим пленочным сорбирующим покрытием, разработанные Кремер. [30]