Cтраница 3
Рассмотрим определение константы диссоциации фермент-субстратного комплекса флуоресцентным методом. [31]
Несомненно, что образование фермент-субстратного комплекса представляет собой основу ферментативного катализа. Одна из ранних теорий ферментативного действия предполагала, что частота столкновений между молекулами двух субстратов увеличивается благодаря образованию тройного комплекса фермента и субстратов. Кошленд рассмотрел эту теорию с количественной стороны и показал, что такой предлагаемый механизм не может играть важной роли в катализе ( табл. 9); тем не менее он является существенной особенностью катализа. [32]
Для того чтобы образование фермент-субстратных комплексов можно было наблюдать непосредственно, концентрации фермента и субстрата должны быть соизмеримыми. [33]
Рассмотрим определение константы диссоциации фермент-субстратного комплекса флуоресцентным методом. [34]
Таким образом, в фермент-субстратном комплексе происходит пространственная деформация и возникает напряжение определенных валентных связей как в молекуле субстрата, так и в активном центре белка; изменяются распределения электронных плотностей и, соответственно, происходит поляризация некоторых связей. Деформация и поляризация основных ковалентных связей приводит к тому, что барьер активации в переходном состоянии преодолевается гораздо легче. Наличие разнообразных флуктуации в электронной и пространственной конфигурациях ферментного белка увеличивает вероятность формирования активированного комплекса, а это соответствует возрастанию абсолютной скорости происходящей реакции. [35]
В обычных условиях ферментативной реакции фермент-субстратный комплекс - образование эфемерное, так как сразу же после его возникновения происходит основная реакция. Однако, если реакция по тем; или иным причинам заторможена ( например, при низкой температуре), то фермент-субстратный комплекс становится способным к длительному существованию. Такая ситуация возникает, в частности, для ферментативной реакции типа А В - - С D при недостатке одного из субстратов. Например, фермент и субстрат А образуют нормальный комплекс, но в отсутствие субстрата В он не способен к дальнейшему превращению и потому стабилен. Именно такой механизм образования стабильного фермент-субстратного комплекса, согласно излагаемой гипотезе, лежит в основе специфического, взаимного распознавания и сцепления клеток в ряде случаев межклеточных взаимодействий. [36]
Факторы диффузии 269 - 271 Фермент-субстратный комплекс 77 ел. Фика законы диффузии 262, 263, 264 Фостера-Ниманна метод 168, 182, 183 Фромма вариант метода графов 291 ел. [37]
Фермент и субстрат могут образовать достаточно прочный фермент-субстратный комплекс только в том случае, если их конфигурации будут точно соответствовать друг другу. Левую ногу можно втиснуть в правую туфлю, а правую руку - в левую перчатку, однако это неудобно, и мы стремимся поскорее исправить ошибку. Нечто аналогичное имеет место и при образовании фермент-субстратного комплекса. Поверхности молекул фермента и субстрата должны быть подогнаны друг к другу почти так же, как ключ к замку; эту теорию и в самом деле часто называют теорией ключа и замка. Подобно тому как определенный ключ может открыть только свой замок, так и определенный фермент построен таким образом, что действует только на определенный субстрат или определенный вид связи. Специфичность ферментов к субстратам напоминает способность замка открываться только своим ключом. [38]
Если предположить, что распад фермент-субстратного комплекса на свободный фермент и продукты реакции происходит очень быстро, то скорость каталитической реакции будет зависеть главным образом от скорости процесса активации. [39]
Внутримолекулярное ( псевдомономолекулярное) превращение фермент-субстратного комплекса. [40]
Суммарная скорость ферментативной реакции определяется концентрацией фермент-субстратного комплекса. По закону действующих масс высокая концентрация субстрата сдвигает равновесие в сторону фермент-субстратного комплекса вплоть до такого состояния, когда все молекулы фермента окажутся связаны с субстратом в комплексе ES. Когда это произойдет, дальнейшее повышение концентрации субстрата уже не увеличивает концентрацию комплекса ES и, следовательно, не увеличивает скорости реакции. [41]
Продукты реакции образуются только при распаде фермент-субстратного комплекса. [42]
Необходимо отметить, что в образовании фермент-субстратного комплекса участвует несколько функциональных групп фермента, но только некоторые пары из них ( субстрата и фермента) ответственны за ферментативный катализ, а другие группы служат для создания связи фермента с субстратом. [43]
Если, лимитирующей является стадия превращения фермент-субстратного комплекса um 2, то KmKs - константа Михаэлиса характеризует процесс диссоциации фермент-субстратного комплекса. Если лимитирует какая-либо другая стадия / ецпгС, то Cm-C s - Таким образом, значение К. [44]
Важно уяснить себе, что образование фермент-субстратного комплекса могло бы быть затруднено как при повышении, так и при понижении температуры. В то время как взаимодействия, определяемые ионными связями, будут при низких температурах усиливаться, гидрофобные взаимодействия могут стать значительно более слабыми. В случае ацетилхолинэстеразы и аце-тилхолина трудно с точностью предсказать влияние температуры на стабильность комплекса, так как в анионном участке действуют и ионные, и гидрофобные связи. [45]